研究发现,玻璃化转变温度越高,冷冻保存过程中因热应力导致的开裂越少。通过实验、图像分析和模拟,团队提出一种重新设计冷冻保存液的新思路。
在冷冻保存领域,有一个常被提到又让人头疼的技术路线就是玻璃化。简单讲,就是用低温把细胞、组织甚至器官冻成类似玻璃的稳定状态。它能帮助保存移植器官、保护濒危物种的生殖材料,还能让某些易变质的药物长期稳定。不过,把玻璃化从微小样本推广到器官这种大块头时,问题就冒出来了,其中最棘手的就是热应力导致的开裂。
物质在冷却时会收缩,不同部位冷得快还是慢,收缩幅度就不一样。器官和保存溶液本身热扩散慢,内部温差容易拉大,这些差异叠加在一起就会把玻璃态材料撑裂。比起传统的慢速冻存方法,玻璃化更容易出现这种问题。
这次研究的核心观点很直接热应力和保存液的玻璃化转变温度之间可能存在强关系。玻璃化转变温度是材料从“像橡皮”变“像玻璃”的分界点。常用的冷冻保存溶液有一个特点几乎都落在非常窄的温度范围,通常在零下一百二十到零下一百三十度之间。这意味着研究者在设计冷冻方案时,几乎一直在和相同的化学特性打交道。玻璃化转变温度本身的影响反而少有人认真讨论。
团队建立了自己的冷冻显微平台,把四种玻璃化转变温度跨度超过五十摄氏度的溶液冷冻到底,用深度学习方法处理图像,量化裂纹范围,同时用热力学有限元模拟解释里面的多物理场过程。结果显示,玻璃化转变温度越高,最终在液氮温度下形成的裂纹越少,热应力也更低。
这个结果和一个有趣的物理规律有关。此前Lunkenheimer等研究者发现玻璃化转变温度越高,材料的热膨胀系数越低。换句话说,温度变化时它的尺寸变化没那么剧烈。这类材料在快速冷却或加热时内部就不会出现那么大的形变差异,也更不容易被拉裂。
如果这个规律对冷冻保存溶液普遍成立,那么目前被广泛使用的那几种保存液,可能在“抗开裂”上并没有天然优势。几十年来,人们习惯围绕那些老牌配方去优化冷却速率、升温方式或容器几何形状,却很少去问一个更根本的问题保存液的化学特性是否本身就是瓶颈之一。
研究者也坦诚了限制。比如,他们把裂纹出现归因于热应力而不是材料韧性差异。不过如果韧性主导,高玻璃化转变温度的材料应该裂得更凶,因为它们会被冷到更深的脆性区。数据反而显示相反。再比如,他们在模拟里默认了玻璃化转变温度和热膨胀之间的关系适用于这些溶液,但这些溶液在原始研究中只占很小部分。未来需要更多实验来独立测量不同保存液的热膨胀特性,以验证这条路径。
还有一个复杂因素是几何形状。不同容器、不同边界条件都会严重影响热应力分布,特别是液面这种可以自由变形的界面。这让结果在推广到其他体系时需要更谨慎。
尽管如此,这项研究提供了一个新的视角冷冻保存液不必被限制在传统的化学配方里。过去几年,科研界越来越意识到需要寻找新的低毒冷冻保护剂,以改善冰晶生成、调控成核行为,或者提升冷却与升温速率。如果在这些新化学体系里,把玻璃化转变温度当成一个可以主动调节的设计参数,也许能更有效地减少热应力带来的开裂。
更高的玻璃化转变温度还意味着到达液氮温度前更不容易结晶,容易出现冰核的温区也变窄。这些因素叠加在一起,说明未来的玻璃化保存液可以从另一条思路出发不光靠操作技巧来避免开裂,还可以从根本的分子结构上减少热应力。
冷冻保存是一门跨越物理、化学、生物工程的综合学问。每往前走一步,都可能是器官移植、濒危物种和生命科学技术的一个突破。玻璃化转变温度这个看似不起眼的参数,也许正是下一代冷冻保存技术里值得被重新审视的一块关键拼图。

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